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本制品基于一种极为灵敏的荧光核酸染料PicoGreen开发而成，其仅在与DNA双链结合后才发出荧光，且所产生的荧光与DNA浓度呈正比，因而可用于精确测量多个来源的dsDNA，包括基因组DNA、病毒DNA、PCR扩增产物、测序文库等。

• 灵敏度高：可检测低至200pg的dsDNA，节省宝贵样品。
  
• 特异性强：在等摩尔的RNA存在的条件下，对dsDNA具有特异性。
  
• 耐受性好：耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖，可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。
  
• 易于使用：只需在样品中加入染料，等待5分钟，然后读数即可，且适用于96和384孔板；与大多数基于荧光的酶标仪和荧光计兼容。
  
• 适用范围广：可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。

• PicoGreen定量试剂含有DMSO（已知有毒试剂），请小心操作；
  
• 尽管目前尚未有数据表明PicoGreen具有诱变性和毒性，但是该试剂能结合双链DNA，请操作时务必小心；
  
• 为了您的健康，实验操作时请穿实验服和戴一次性手套。
  
• 本制品仅用作科研用途！

• 染料工作液的配置
  200×PicoGreen双链DNA定量试剂取出后回温至室温，该试剂是以100μL 200×的浓缩液形式保存于无水DMSO中的。实验当天，根据实验用量用1×TE（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH7.5）按1:200的比例稀释。
  注：
  ① 由于试剂容易吸附到玻璃表面，要在塑料容器中配制。
  ② PicoGreen双链DNA定量试剂见光易降解，所以应将配好的溶液用铝箔包住或放置暗处避光保存。
  ③ 溶液最好在配制好数小时内使用，以保证最佳结果。
  
• 标准品工作液的配制
  取λDNA标准品，用无菌TE buffer配制成100μg/mL的标准品工作液。
  注：标准品也可用其他已知浓度的纯化DNA；有一些产品描述可使用小牛胸腺DNA作为标准品，按照我们实际操作经验，并不推荐它作为标准品。
  
• 标准品工作液稀释
  
  • 母液稀释：使用TE缓冲液将100μg/mL的标准品稀释为2μg/mL。
    
  • 梯度稀释：参照表1，对DNA标品母液进行梯度稀释。
    表1．标曲制作

    TE体积（μL）	2μg∕mL DNA标准品母液（μL）	Picogreen染料工作液（μL）	DNA标准品终浓度
    0	1,000	1,000	1μg/mL
    900	100	1,000	100ng/mL
    990	10	1,000	10ng/mL
    999	1	1,000	1ng/mL
    1,000	0	1,000	Blank

    
    
  • 标准曲线的制备：向经稀释的各梯度标准品溶液中加入1mL染料工作液混匀，避光室温孵育5min。使用酶标仪或荧光计检测荧光强度（Ex=480nm，Em=520nm）；将溶液加入比色皿或取200μL加入微孔板，确信不要在样品中引入气泡；以1×TE缓冲液空白对照，测定标准品荧光值；用标准品溶液的浓度（ng/mL）对应的荧光强度作直线回归，制备标准曲线。
    
  • 测量剩余样品的荧光值：荧光计将给出一个直接的浓度读数，数据可以用来产生DNA浓度的标准曲线。